Попов Д.А., Овсеенко С.Т., Вострикова Т.Ю.ЭКСПРЕСС-ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ ГЕМОКУЛЬТУР С ПОМОЩЬЮ МЕТОДА ПРЯМОЙ MALDI-TOF-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ.
Попов Д.А., Овсеенко С.Т., Вострикова Т.Ю.
ЭКСПРЕСС-ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ ГЕМОКУЛЬТУР С ПОМОЩЬЮ МЕТОДА ПРЯМОЙ MALDI-TOF-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ
ФГБНУ НЦ ССХ им. А.Н. Бакулева, 121552, Москва
Цель исследования. Оценить эффективность прямой идентификации возбудителей бактериемии с помощью
прямой матричной лазерной десорбционной ионизационной времяпролетной (MALDI-TOF) масс-спектрометрии
в сравнении с рутинным методом. Материал и методы. В проспективное исследование включено 211 положи-
тельных гемокультур, полученных от 116 пациентов (106 взрослых и 10 детей) в возрасте от 2 нед до 77 лет,
находящихся в ОРИТ после операций на открытом сердце. Инкубация осуществлялась в аэробных флаконах с
сорбентом для антибиотиков с помощью анализатора BacT/ALERT 3D 120 (bioMerieux, Франция). Параллель-
но с рассевом первичных гемокультур на плотные питательные среды с последующей идентификацией чи-
стых культур с применением MALDI-TOF-масс-спектрометрии на анализаторе Vitek MS, bioMerieux, Франция
(рутинный метод), после соответствующей пробоподготовки осуществляли прямое (без предварительного
рассева) MALDI-TOF-масс-спектрометрическое исследование монокомпонентных гемокультур (n = 201). Ре-
зультаты. С применением рутинного метода в 211 положительных гемокультурах идентифицировано 23 вида
микроорганизмов (стафилококки (n = 87), энтеробактерии (n = 71), энтерококки (n = 20), неферментирующие
грамотрицательные бактерии (n = 18), прочие (n = 5)). Среднее время инкубации образцов до получения сигнала
о наличии роста гемокультуры составило 16,2±7,4 ч (от 3,75 до 51 ч). В течение первых 12 ч инкубации получен
рост 32,4% проб, а в первые сутки – 92,2%. При прямом масс-спектрометрическом анализе монокомпонентных
гемокультур (n = 201) корректно определено до вида 153 (76,1%) образца, при этом доля успешных иденти-
фикаций грамотрицательных бактерий была выше, чем грамположительных (85,4 и 69,1% соответственно;
p = 0,01). Выявлена высокая степень согласованности результатов стандартного и прямого методов иден-
тификации гемокультур с помощью MALDI-TOF-масс-спектрометрии (κ = 0,96, p < 0,001; в расчет включены
образцы, для которых оба варианта дали результат). Случаи неудачной прямой идентификации гемокультур
(n = 48) в большинстве (89,6%) были связаны с невозможностью соотнесения полученного при анализе образца
масс-спектра с библиотечным (ответ системы – «нет идентификации»). В остальных 5 случаях выявлено
расхождение результатов, при этом в трех пробах отмечено несовпадение вида микроорганизма, не имею-
щее клинического значения (S. haemolyticus (n = 2) и S. hominis (n = 1) по данным масс-спектрометрического
анализа и S. epidermidis в посеве), в двух случаях микроорганизм идентифицирован неправильно (Mycobacterium
kansasii и Burkholderia vietnamensis вместо S. epidermidis и S. hominis соответственно). Среди включенных в
исследование образцов было 10 смешанных культур (ассоциации из двух микроорганизмов), которые также
были подвергнуты прямому масс-спектрометрическому анализу. При этом в 7 (70%) случаях был определен
до вида один микроорганизм из ассоциации, в 2 случаях имела место корректная идентификация одного из
микроорганизмов до рода, еще в одной пробе результат не получен. Временные затраты на проведение прямого
масс-спектрометрического анализа, включая пробоподготовку, составляли не более 1 ч. Вывод. Метод пря-
мой MALDI-TOF-масс-спектрометрии позволяет значимо ускорить идентификацию гемокультур, что может
способствовать максимально раннему назначению эффективных режимов стартовой антибиотикотерапии.
