Агар трехсахарный с железом (TSI) может использоваться для дифференциации кишечных грамотрицательных энтеробактерий на основании ферментации углеводов и образования H2S. Он используется как вспомогательная среда для идентификации патогенных и сапрофитных энтеробактерий, выделенных при стандартном бактериологическом анализе проб, например фекалий. Среда используется для начала идентификации энтеробактерий в некоторых схемах FDA (США).
Пептоновая смесь, мясной и дрожжевой экстракты являются источниками питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Агар TSI содержит три углевода (декстроза, сахароза и лактоза), которые являются источниками углерода и энергии. Образование кислоты в процессе их ферментации определяется с помощью индикатора фенолового красного, который меняется на желтый цвет при закислении среды и на красный – при защелачивании. Тиосульфат натрия восстанавливается до сульфида водорода, который реагирует с солью железа с образованием черного сульфида железа. Цитрат аммонийного железа – индикатор образования H2S. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.
Глюкоза присутствует в среде в концентрации 1/10 по отношению к лактозе или сахарозе и способствует обнаружению микроорганизмов, ферментирующих только ее. В результате ферментации глюкозы на скошенной поверхности агара образуется небольшое количество кислоты, которая быстро окисляется. При этом цвет среды остается красным. С другой стороны, та же самая реакция внутри столбика агара, вследствие низкой концентрации кислорода, приводит к устойчивому снижению уровня рН и пожелтению среды. После истощения запасов глюкозы, начинается ферментация лактозы или сахарозы организмами, способными к их утилизации. Для улучшения воздухообмена на поверхности скоса не следует плотно закрывать пробирки.
Тип реакции такой же, как в случае Агара Клиглера с железом, который содержит два сахара. Добавление 1% сахарозы к агару TSI позволяет проводить дифференциацию между протеями и сальмонеллами. При ферментации сахарозы протеями цвет фенолового красного на поверхности меняется с красного на желтый. Виды рода Salmonella, положительные по декстрозе и отрицательные по лактозе, вызывают покраснение поверхности агара и пожелтение глубоких слоев среды.
Европейская Фармакопея для обнаружения сальмонелл рекомендует отдельно переносить исследуемые колонии на Агар трехсахарный с железом, инокулируя поверхностным и глубинным методами. О наличии сальмонелл в местах глубинной инокуляции свидетельствует смена цвета среды (с красного на желтый), обычно с образованием газа с формированием сульфида водорода в агаре или без такового. Более точное определение может быть получено путем проведения соответствующих биохимических и серологических тестов.
Инокулировать и инкубировать 18–72 часа при 35±2°C.
