microbius
РОССИЙСКИЙ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ПОРТАЛ
Поиск
rss

ООО "АЛИФАКС"

ИНН 7718314415

ID 2Vtzqx7tLnC

Реклама

ООО "АЛИФАКС"

ИНН 7718314415

ID 2VtzqwzYS9e

Реклама

ООО "АЛИФАКС"

ИНН 7718314415

ID 2VtzqvtsLHv

Реклама
Смирнова Н.С., Шипина Л.К., Лапенкова М.Б., Владимирский М.А. ПРИМЕНЕНИЕ ЛИТИЧЕСКОГО МИКОБАКТЕРИОФАГА D29 ДЛЯ УСКОРЕННОГО ФЕНОТИПИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА К ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫМ ПРЕПАРАТАМ.

Смирнова Н.С., Шипина Л.К., Лапенкова М.Б., Владимирский М.А. ПРИМЕНЕНИЕ ЛИТИЧЕСКОГО МИКОБАКТЕРИОФАГА D29 ДЛЯ УСКОРЕННОГО ФЕНОТИПИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА К ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫМ ПРЕПАРАТАМ.

УДК 615.281.03:616-002.5].015.8.076.7
Смирнова Н.С., Шипина Л.К., Лапенкова М.Б., Владимирский М.А.
ПРИМЕНЕНИЕ ЛИТИЧЕСКОГО МИКОБАКТЕРИОФАГА D29 ДЛЯ УСКОРЕННОГО
ФЕНОТИПИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКОБАКТЕРИЙ
ТУБЕРКУЛЕЗА К ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫМ ПРЕПАРАТАМ


ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова», НИИ
фтизиопульмонологии, Минздрава РФ, 127994, Москва


В условиях широкого распространения лекарственно-устойчивых штаммов микобактерий туберкулеза (МБТ) необхо-
димость ускоренных, в том числе фенотипических, методов определения чувствительности микобактерий к антими-
кробным химиотерапевтическим препаратам в клинических образцах является актуальным вопросом. Представлены
результаты применения ускоренного фенотипического метода определения чувствительности к антимикробным хими-
отерапевтическим препаратам клинических штаммов МБТ на основе применения литического микобактериофага D29.
Принцип метода состоит в оценке размножения микобактериофага в клетках МБТ в зависимости от ингибирования
метаболизма растущих микобактерий в присутствии чувствительных к ним антибактериальных препаратов. Размно-
жение микобактериофага оценивается посредством количественного анализа ДНК фага в полимеразной цепной реак-
ции в реальном времени (ПЦР-РВ). В работе использованы 102 клинических штамма МБТ, полученные после первичного культивирования или рекультивирования в пробирках системы MGIT (Bactec). После получения положительных результатов роста МБТ образцы инкубировали в течение 48 ч в CO2-инкубаторе в присутствии критических концентраций 10 широко употребляемых при лечении туберкулеза лекарственных субстанций в жидкой питательной среде Миддлбрук 7H9, обогащенной компонентами OADC, в формате 24-луночного культурального планшета с объемом питательной среды 1 мл на лунку, после чего в лунки планшета вносили 2·• 103 плакобразующих единиц микобактериофага D29. Через 24 ч проводилось количественное определение ДНК фага с помощью ПЦР-РВ с использованием реагентов фаг D29, ООО«Синтол». Увеличение порогового уровня флюоресценции Ct более чем на 2 цикла в пробах с антибиотиком в сравнении с контролем свидетельствует о чувствительности исследуемого штамма МБТ к антибиотику. При сравнительном исследовании с посевом на питательную среду Левенштейна - Йенсена уровень совпадений полученных результатов составил 91%. При сравнительном исследовании с тест-системой Bactec ограниченного числа штаммов с определением чувствительности для 10 препаратов уровень совпадений результатов — 96%. Подтверждены данные об обратной зависимости величины ΔCt и минимальной ингибирующей концентрации препарата. Отмечена предполагаемая высокая эффективность возможного набора реагентов на основе приведенного метода по критерию цена/качество.

primenenie-liticheskogo-mikobakteriofaga-d29-dlya-uskorennogo-fenotipicheskogo-opredeleniya-chuvstvitelnosti-mikobakteriy.pdf

Узнайте о новостях и событиях микробиологии
Первыми получайте новости и информацию о событиях
up