УДК 602.3:579.6 DOI 10.18286/1816-4501-2018-2-110-113
УСТАНОВЛЕНИЕ ВИДОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ ШТАММОВ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ МЕТОДОМ MALDI-TOF MS
Васильев Дмитрий Аркадьевич, доктор биологических наук, профессор кафедры «Микробио-
логия, вирусология, эпизоотология и ветеринарно-санитарная экспертиза»
Феоктистова Наталья Александровна, кандидат биологических наук, доцент кафедры «Ми-
кробиология, вирусология, эпизоотология и ветеринарно-санитарная экспертиза»
Мастиленко Андрей Владимирович, кандидат биологических наук, доцент кафедры «Микро-
биология, вирусология, эпизоотология и ветеринарно-санитарная экспертиза»
Cyльдинa Екатеpинa Влaдимиpовнa, ассистент кафедры «Микробиология, вирусология, эпи-
оотология и ветеринарно-санитарная экспертиза»
ФГБОУ ВО Ульяновский ГАУ
432017, г. Ульяновск, бульвар Новый Венец, 1; 8(8422)55-95-47; e-mail: feokna@yandex.ru
Ключевые слова: Proteus mirabilis, Yersinia enterocolitica, Enterobacter cloacae, MALDI-TOF-профилирование,
масс-спектрометрия.
В статье представлены результаты использования масс-спектрометрии MALDI-TOF с целью иден-
тификации микроорганизмов видов Proteus mirabilis, Yersinia enterocolitica, Enterobacter cloacae, которые были
выделены в 2016 году из патологического материала и объектов санитарного надзора животноводческих и
птицеводческих помещений хозяйств, неблагополучных по желудочно-кишечным заболеваниям. Первично ви-
довая дифференциация проводилась на основании изучения тинкториальных, культурально-морфологических
и биохимических свойств. Для исследования протеомов бактериальных культур было проведено их MALDI-TOF-
профилирование (анализ профилей белков, которые извлекаются из целых бактерий) и подтверждено их со-
ответствие определяемым видам. Отпечатки белков с различными молекулярными массами получали с ис-
пользованием MALDI-TOF масс-спектрометра Microflex LT (BrukerCorp., Billerica, USA) с обнаружением в линейном
положительном режиме на частоте лазера 50 Гц и в диапазоне масс от 2000 до 30 000 Да. Напряжение разгона
составляло 20 кВ, а время задержки экстракции 200 нс. Для генерации каждого ионного спектра использовалось
не менее 10 лазерных снимков на образец. Для каждого бактериального образца в общей сложности 100 отпе-
чатков белков с различными молекулярными массами усредняли и обрабатывали с использованием программ-
ного обеспечения MALDI Biotyper (BrukerCorp., Billerica, USA). Так, в проведенных исследованиях установлено, что
штамм Prot2 принадлежит к виду Proteus mirabilis, Ye3 –Yersinia enterocolitica, En2 – Enterobacter cloacae.
