Новости

Согласно результатам, опубликованным в журнале The Lancet Infectious Diseases, среди пациентов с туберкулезом в странах с высоким уровнем заболеваемости более 80% не сообщали о постоянном кашле и более 60% вообще не сообщали о его наличии.    "Будьте внимательны: пациент, у которого есть факторы риска развития туберкулеза (например, проживание в стране с высоким уровнем заболеваемости туберкулезом, диабет 2 типа, ВИЧ, злоупотребление алкоголем), может иметь легочный туберкулез при отсутствии (упорного) кашля", - говорит Франк Кобеленс, профессор Амстердамского университет. "Для специалистов в области общественного здравоохранения, работающих в условиях высокой заболеваемости туберкулезом, это означает необходимость расширения активного выявления случаев туберкулеза путем рентгенологического обследования грудной клетки в более широких масштабах, чем это делается в настоящее время", - добавляет Кобеленс.    В мета-анализе данных Кобеленс и его коллеги оценили 12 обследований (n = 602 863; 50,7% моложе 35 лет; 57,6% женщин) в Африке (59,4%) и Азии (40,6%) - на обоих континентах с высоким уровнем заболеваемости ТБ в период с 2010 по 2019 год - для определения распространенности субклинического легочного ТБ с использованием трех различных дефиниций клинических случаев. В ходе этих исследований собирались данные рентгенографии грудной клетки и скрининга симптомов, чтобы определить, есть ли у пациентов туберкулез. Для данного анализа исследователи стандартизировали эти критерии и определили ТБ как положительную культуру мокроты на Mycobacterium tuberculosis.    Из трех определений субклинического ТБ одно учитывало отсутствие постоянного кашля (кашель длится ≥ 2 недель), другое - отсутствие кашля вообще и последнее - отсутствие нескольких симптомов, включая кашель, лихорадку, боль в груди, ночную потливость и потерю веса. Небольшая часть общей когорты была больна туберкулезом (n = 1 944; 0,3%). В популяции пациентов с ТБ, скорректированной с учетом ложноотрицательных результатов рентгенографии грудной клетки и неинтерпретируемых результатов посева (n = 1065), исследователи обнаружили высокую долю пациентов без постоянного кашля и пациентов совсем без кашля.    "Из предыдущих систематических обзоров уже было известно, что при активном поиске в обществе до половины больных туберкулезом являются "субклиническими" - но это было плохо определено и не учитывало недооценку диагнозов туберкулеза", - говорит Кобеленс. "Мы были удивлены, когда увидели, что симптом, который считается наиболее характерным для туберкулеза, - упорный кашель - отсутствует у четырех из пяти человек, страдающих активным туберкулезом". Исследователи также заметили, что 27,7% пациентов с туберкулезом из четырех опросов не сообщили ни о каких симптомах, указывающих на туберкулез.    Из четырех демографических показателей (возраст, география, регион и пол) только пол оказался существенно связан с вероятностью отсутствия постоянного кашля и кашля вообще при ТБ. Иерархический регрессионный анализ (n = 1 813) показал, что у мужчин по сравнению с женщинами с ТБ ниже вероятность отсутствия постоянного кашля и отсутствия кашля вообще. Наконец, положительный посев мазка, сигнализирующий об инфекционности, был обнаружен у 29,1% пациентов с ТБ и отсутствием упорного кашля, что, по словам Кобеленса, было удивительно. Чуть меньше пациентов с туберкулезом и отсутствием кашля имели положительный посев.    Будущие исследования на эту тему должны отличаться во многих отношениях, считает Кобеленс. "Один из примеров - испытания новых противотуберкулезных вакцин, чтобы показать их клиническую эффективность в профилактике туберкулеза", - пояснил он. "В настоящее время в этих испытаниях "клинической конечной точкой" является симптоматический ТБ, часто основанный на кашле. Вероятно, нам необходимо расширить определения этих конечных точек, включив в них туберкулез без кашля или вообще без каких-либо симптомов", - сказал Кобеленс.    "Еще один момент - нам нужны более простые и дешевые методы диагностики, которые могли бы заменить рентгенографию грудной клетки и позволить расширить масштабы общественного скрининга на ТБ в сообществах с высоким уровнем заболеваемости, что требует проведения разработок таких методов диагностики и клинических исследований для оценки их эффективности, рентабельности и приемлемости для медицинских работников и пациентов", - добавил он.

Многоцелевые экраны Cas13 помогают исследователям избежать необратимых повреждений ДНК и избежать истощения Т-клеток.    Многие основополагающие исследовательские технологии изменили клеточную терапию, продвинув ее от концепции до клиники. За последнее десятилетие химерные антигенные рецепторы (CAR) и редактирование генома - две наиболее яркие технологии, которые привели к созданию прорывных CAR T-клеточных терапий для лечения лейкемии и лимфомы. Ученые разрабатывают эти методы лечения с помощью опосредованной вирусами вставки генов ex vivo, что заставляет T-клетки экспрессировать синтетические рецепторы, которые обнаруживают специфические для опухоли антигены и направляют уничтожение раковых клеток после трансплантации.     Исследователи изучают редактирование с помощью кластерных регулярно перемежающихся коротких палиндромных повторов (CRISPR), чтобы улучшить CAR терапию T-клеток и расширить ее применимость к большему числу типов рака. Однако инструменты для резки генома на основе CRISPR-ассоциированной нуклеазы 9 (Cas9) имеют уникальные ограничения по безопасности и эффективности в связи с постоянной природой изменения ДНК.    Чтобы обойти эти ограничения, биоинженер Стэнли Ци и врач-иммунолог Кристал Маколл из Стэнфордского университета разработали инструмент для редактирования РНК под названием мультиплексированные эффекторные направляющие массивы (MEGA). В исследовании, опубликованном в журнале Cell, команда использовала двоюродную сестру Cas9, Cas13, и объединенный массив направляющих РНК для одновременного редактирования транскриптов нескольких генов в первичных человеческих Т-клетках, не нацеливаясь на геномную ДНК и не разрезая ее. Этот метод мультитаргетинга решает проблему оптимизации клеточной терапии, позволяя исследователям динамически регулировать несколько механизмов в каждой Т-клетке, а не добавлять или удалять отдельные гены по одному за раз. Исследователи провели скрининг генов, которые синергически влияют на функции Т-клеток, и отключили избыточные транскрипты, которые приводят к истощению Т-клеток в культуре и у мышей.    "Наш многолетний опыт редактирования генов на уровне ДНК позволяет нам понять, что эта технология, хотя и очень мощная, все же имеет ряд присущих ей проблем, которые, возможно, удастся решить, только если мы найдем методы инженерии РНК", - говорит Ци. Среди этих трудностей - внецелевые разрезы и накопление геномной нестабильности в результате множественного редактирования ДНК. "РНК - это совершенно другое. Если мы нацеливаемся на РНК, мы не трогаем всю ДНК, и редактирование РНК обратимо", - объясняет Ци. Еще одним преимуществом Cas13 является способность обрабатывать несколько уникальных направляющих РНК из одного массива, что позволило исследователям нацеливаться сразу на несколько РНК-транскриптов в одной клетке.    Сначала исследовательская группа испытала MEGA в культуре клеток. Чтобы проверить этот метод, они нацелились сразу на три ранее установленных ингибитора функции Т-клеток, что позволило эффективно подавить истощение Т-клеток. Ученые также провели крупномасштабный комбинаторный скрининг с использованием множества направляющих матриц, выявила новые генетические регуляторы функции Т-клеток и создала лекарственно-индуцируемую форму MEGA для дозозависимой активации CAR. Затем они использовали MEGA для повышения пригодности CAR T-клеток и противоопухолевой активности в совместных культурах раковых клеток и в мышиной модели лейкемии путем нарушения нескольких компонентов метаболического пути в T-клетках перед трансплантацией.    "Это прекрасная статья. Она добавляет еще одно измерение к тому, что мы уже смогли сделать с помощью ДНК-мишеней CRISPR, используя преимущества этой превосходной платформы РНК-мишеней CRISPR", - считает Невилл Санджана, биоинженер из Нью-Йоркского университета, который не принимал участия в этом исследовании.  "Нам нужен широкий набор геномных технологий. Cas9 и Cas13 - отличные методы, но возможность включать и выключать гены и делать это мультиплексно - вот то будущее, которого мы действительно хотим".    В этом будущем могут появиться новые возможности для контроля истощения Т-клеток, что еще больше укрепит CAR T-терапию и другие методы лечения на основе иммунных клеток, особенно при лечении солидных опухолей. Результаты исследования Ци и Макколла показали, что метаболическая сигнализация является потенциальным модифицируемым путем, вовлеченным в истощение Т-клеток, что выходит за рамки традиционного фокуса на активации CAR. "Я думаю, что сейчас возникает возможность "CAR плюс" - не просто введение CAR, а способность делать другие вещи с Т-клетками, чтобы сделать их более стойкими и более эффективными", - говорит Санджана. "Я думаю, что способ, который продемонстрировали Стэнли и коллеги, как раз и является частью этого будущего".